Inducción de embriogénesis somática en Perezia pinnatifida Wedd., Planta Medicinal Altoandino. / Rosa Blanca, Espinoza Del Rio

Incluye: Anexo

ASESOR: Dr. Walter Juan Vásquez Cruz

Tesis para optar el titulo de Ingeniero Agrónomo - 2013

Bibliografía: h. 64 - 73.

Índice: I. Introducción -- II. Marco teórico -- III. Materiales y métodos -- IV. Resultados y discusión -- V. Conclusiones -- VI. Recomendaciones.

La presente investigación, se realizó en el Laboratorio de Biología de la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional "Santiago Antúnez de Mayolo", ubicado en la Ciudad Universitaria de Shancayan, Provincia de Huaraz, Departamento de Ancash durante el periodo comprendido entre los meses de Marzo- Agosto del 2013.
Para la obtención de embriones somáticos, se siguieron las siguientes etapas: inducción de callos; inducción de callos embriogénicos; proliferación y maduración de embriones somáticos; en las que se evaluaron mensualmente la formación de callos y su diámetro; mientras que para la etapa de germinación, se evaluó el diámetro de los callos y el número de brotes. Se identificaron los estados de los embriones somáticos. Se utilizó el Diseño Completamente al Azar DCA y la prueba de comparación de medias de Duncan (a=0,05).
Se emplearon explantes pequeños de aproximadamente 20 a 30 mm, cultivados en el medio de cultivo de Murashige y Skoog (1962), a mitad de sales es decir a mitad de concentración, 2.2 g/L; suplementado con sacarosa al 25%; como agente gelificante se usó phytagel al 0.3%; con un pH de 5.67; con o sin reguladores de crecimiento por un fotoperiodo de 16 horas, a una temperatura ambiental entre 16 y 20°C; para todo el proceso.
Para la etapa de inducción se probaron 5 tratamientos: M0 (sin hormona); M1 (1mg/L de ANA); M2 (2mg/L de ANA), M3 (1mg/l. de 2,4-D) y M4 (2mg/L de 2,4-D). Para la etapa de multiplicación se probaron 7 tratamientos, usando los explantes que en las etapas anteriores dieron buenos resultados, como los del tratamiento M1 (1mg/L. ANA) y M2 (ANA 2mg/L), los cuales fueron colocados en medios con hormonas BAP y ANA para la regeneración de los embriones somáticos; estos tratamientos fueron: M0 (sin hormona): M1T1 (BAP 0,5mg/L), M1T2 (BAP 1,0mg/L); M1T3 (BAP 0,5mg/L + ANA 0,05mg/L); M2T4 (BAP 0,5mg/L), M2T5 (BAP 1,0mg/L); M2T6 (BAP 0,5mg/L + ANA 0,05mg/L).
Se observó al cuarto mes que: el mejor tratamiento para la formación y diámetro de callos fue el tratamiento M1 (ANA 1mg/L); por otro lado en la etapa de germinación se observó que el mayor diámetro de callos y mayor número de embriones somáticos germinados, se mostraron en el tratamiento M1T1 (BAP 0,5mg/L) y el tratamiento M1T2 (BAP 1mg/L), sin existir una diferencia estadística entre ambos.

Agronomía