Aislamiento de Rhizobium leguminosarum B de raices de frijol Phaseolus vulgaris I. y su sensibilidad a tres fungicidas /

Ramírez Paredes, Hernán

Aislamiento de Rhizobium leguminosarum B de raices de frijol Phaseolus vulgaris I. y su sensibilidad a tres fungicidas / Hernán Ramírez Paredes - Huaraz - Perú Universidad Nacional Santiago Antúnez de Mayolo. Facultad de Ciencias Agrarias 2001 - 62 [70] hojas. Cuadro ; fotos b/n ; mapa ; 30 cm.

Incluye: Anexo ASESOR: Ing. Nelly Caycho Medrano

Tesis para optar el titulo de Ingeniero Agrónomo 2001

Bibliografía: h. 59 - 61.

I. Introducción -- II. Revisión de literatura -- III. Materiales y métodos -- IV. Resultados y discusión -- V. Conclusiones -- VI. Recomendaciones -- VII. Bibliografía -- VIII Anexo

El presente trabajo de investigación se realizó en el laboratorio de Biología de la Fac. de Ciencias del Ambiente y Suelos de la Facultad de Ciencias Agrarias de la UNASAM; durante los meses del primero de junio al primero de diciembre del 2000 con la finalidad de aislar Rhizobíum leguminosarum. B, de raíces de frijol Phaseolus vulgaris l eficientes probaron su sensibilidad a tres fungicidas Dithane, Kaptan y Cercobín la metodología seguida fue colectar muestras de raíces de frijol nodulados de los lugares: A) Llacta – Pan de Azúcar, 10 muestras en (Caraz-Yungay);B) Tinco diez muestra en Carhuaz, C) Monterrey - Mitopampa diez muestras y Huaraz-Recuay, todas fueron llevados al laboratorio, escogidos los mejores nódulos con características de tamaño grande, estriados, color rosado oscuro se juntó por lugares y se desinfectó pura machacarlas comprobando con la tinsión Gram observándose al microscopio R. Leguminosarum B. y Otros microorganismos ajenos; seguidamente se sembró en medio específico ELMARC, creciendo cepas puras y verificadas nuevamente con la tinsión Gram, se obtuvo cuatro cepas de A) Llacta- P. Azúcar, siete cepas de B) Tinco y cinco cepas de C) Monterrey - Mitopampa; evaluados por su velocidad de crecimiento y características de color y consistencia; se reduciéndose a cuatro cepas de los lugares referidos. Prosiguiendo el aislamiento se sometieron a pruebas bioquímicas: en la primera prueba evaluó la producción de sustancia ácida o alcalina resultando cepas de Llacta - P Azúcar (A1, A2) neutra, y (A3) ácida; de Tinco 2 cepas neutras (B3, B7) y una ácida (B2); Monterrey - Mitopampa una (C2) ácida.
La segunda prueba; se evaluó el crecimiento en diferentes concentraciones de cloruro de sodio; se obtuvo crecimiento abundante de cepas a concentración del ﻮ%n crecimiento mínimo o nulo a la concentración a 5%. La tercera prueba de tolerancia, a la acidez de las cepas Llaccta =P. Azúcar, Tinco fueron tolerantes y de Montery - Mitopampa no toleraron la acidez; equilibrado a un Hp = 4.5.se consideró comprobar la pureza del R, Leguminosarum B. y se sometió a la cuarta prueba de leche tornasolada; mostrando 2 cepas contaminadas de Llacta P, Azúcar y otra de Monterrey - Mitopampa, La Quinta prueba; de crecimiento nulo de R. leguminosarum en glucosa, mostró a 4 cepas: de Llacta y P. Azúcar y 2: cepas de Tinco sin crecimiento y ni cambio de color; la de Monterrey – Mitopampa creció mostrando contaminación. Se clasificaron 2 cepas de Llacta - P. Azúcar ( A1,A2) y 2 cepas de Tinco ( B3,B7 ); las que fueron inoculadas semillas de frijol de la var. Blanco Larán y sembradas en 12 macetas, 3 por cada cepa seleccionada y 3 testigos; al estado de floración se evaluaron considerando: número de hojas y nódulos, altura de planta; obteniéndose estimados superiores comparados con el testigo en toda las cepas, para corroborar datos se realizó el análisis foliar en el laboratorio de suelos de la Facultad de Ciencias Agrarias los resultados en porcentaje de nitrógeno confirmaron los datos obtenidos
En la segunda parte del experimento se juntó toda las cepas aisladas y fueron sometidos al efecto de 3 fungicidas ( Dithane, Kaptan y Cercobín ); con la técnica de discos de papel filtro impregnados con los mencionados fungicidas se realizó el experimento en placas de Petri que previamente se prepararon con medio ELMA. Juntas las 4 Cepas aisladas eficientes, en una disolución de 10⁷, ufc/ml. se vertió en las placas homogenizando, Se colocó discos de 5mm, por placa y señaladas con los nombres de los fungicidas y el testigo; se observó los halos de inhibición que fueron medidos sus diámetros y se dispuso del Diseño Completamente al Azar con Arreglo Factorial de 4x4x3, evidenciando significación, confirmando que se produce efecto en la vialidad de R. Leguminosarum B.





TRABAJOS DE INVESTIGACION
FINALIDAD DE AISLAR RHIZOBIUM LEGUMINOSARUM
RAICES DE FRIJOL PHASEOLUS VULGARIS L

Universidad Nacional Santiago Antúnez de Mayolo

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